أورليستات
C29H53NO5 495.73
ل-ليوسين، N-فورميل-، 1-[(3-هكسيل-4-أوكسو-2-أوكسيتانيل) ميثيل] دوديسيل إستر، [2S-[2(R*)، 3]]-;
N-فورمايل-ل-ليوسين، إستر مع (3S,4S)-3-هكسيل-4-[(2S)-2-هيدروكسيتريدسيل]-2-أوكسيتانون [96829-58-2].
التعريف
يحتوي أورليستات على NLT 98.0% وNMT 101.5% من C29H53NO5، محسوبة على أساس لا مائي، مذيب-خالي.
تحديد الهوية
• أ. امتصاص الأشعة تحت الحمراء<197M>
• ب. يتوافق وقت الاحتفاظ بالذروة الرئيسية لمحلول العينة مع زمن الاحتفاظ بالمحلول القياسي، كما تم الحصول عليه في الفحص.
الفحص
• الإجراء
[ملاحظة-تجنب استخدام القوارير البلاستيكية لتحضير أو احتواء أي محلول في هذا التحليل. ]
الطور المتحرك: الأسيتونيتريل، وحمض الفوسفوريك، والماء (860: 0.05: 140)
الحل القياسي: 0.5 ملغم/مل من USP Orlistat RS في الطور المتنقل. قم بالحقن مباشرة بعد التحضير أو قم بتخزينه في الساعة 5.
محلول العينة: 0.5 ملغم/مل من أورليستات في الطور المتحرك. قم بالحقن مباشرة بعد التحضير أو قم بتخزينه في الساعة 5.
النظام الكروماتوغرافي
(انظر الفصل اللوني<621>، مدى ملاءمة النظام.)
الوضع: إل سي
الكاشف: الأشعة فوق البنفسجية 195
العمود: 3.9-مم × 15-سم؛ 4-ميكرومتر تعبئة L1
معدل التدفق: 1.0 مل/دقيقة
حجم الحقن: 20 ميكرولتر
ملاءمة النظام
العينة: الحل القياسي
متطلبات الملاءمة
الانحراف المعياري النسبي: NMT 2.0%
التحليل
العينات: الحل القياسي وحل العينة
احسب نسبة الأورليستات (C29H53NO5) في الجزء المأخوذ من الأورليستات:
النتيجة = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = ذروة الاستجابة من محلول العينة
rS = استجابة الذروة من الحل القياسي
CS = تركيز USP Orlistat RS في المحلول القياسي (مجم/مل)
CU = تركيز الأورليستات في محلول العينة (ملجم/مل)
معايير القبول: 98.0%-101.5% على الأساس اللامائي والمذيب-الخالي
الشوائب
الشوائب غير العضوية
• بقايا على الاشتعال<281>: NMT 0.1%
• المعادن الثقيلة، الطريقة الثانية<231>: 20 جزء في المليون
الشوائب العضوية
• الإجراء 1: الحد الأقصى للمركب المرتبط بأورليستات أ
الحل القياسي: 0.1 ملغم/مل من مركب USP Orlistat المرتبط A RS في الأسيتون
محلول العينة: 50 ملغم/مل من أورليستات في الأسيتون
النظام الكروماتوغرافي
(انظر الفصل اللوني<621>، الفصل اللوني للطبقة الرقيقة-الفصل اللوني).)
الوضع: تي إل سي
الممتزات: طبقة بسمك 0.25 ملم من خليط هلام السيليكا الكروماتوجرافي
حجم التطبيق: 10 ميكرولتر
تطوير نظام المذيبات: التولوين وخلات الإيثيل (4:1)
محلول الكشف: انقل 2.5 جم من حمض الفسفوموليبدك و1 جم من كبريتات السيريك إلى دورق حجمي سعة 100-مل، ثم قم بإذابته في الميثانول وتخفيفه حتى يصل إلى الحجم.
التحليل
العينات: الحل القياسي وحل العينة
قم بإزالة اللوحة، وجففها بالهواء جيدًا. رش الطبق المجفف بمحلول الكشف، ثم ضع الطبق في الفرن على درجة حرارة 120 لمدة 30 دقيقة.
معايير القبول: أي بقعة ثانوية من محلول العينة المقابلة للمركب A المرتبط بأورليستات ليست أكثر كثافة من البقعة المقابلة من المحلول القياسي (0.2٪).
• الإجراء 2: الحد الأقصى للمركب المرتبط بأورليستات ب
الحل القياسي: 0.025 ملغم / مل من مركب USP Orlistat المرتبط B RS في كلوريد الميثيلين
محلول العينة: 50 ملغم/مل من أورليستات في كلوريد الميثيلين
محلول العينة المسننة: 50 ملغم/مل من أورليستات في محلول قياسي
النظام الكروماتوغرافي
(انظر الفصل اللوني<621>، مدى ملاءمة النظام.)
الوضع: جي سي
الكاشف: تأين اللهب
العمود: 0.32-مم × 30-م من السيليكا المنصهرة، ومغطى بمرحلة ثابتة G27 مقاس 0.25-ميكرومتر
درجة حرارة العمود: انظر جدول برنامج درجة الحرارة أدناه.
درجة الحرارة الأولية () منحدر درجة الحرارة (/ دقيقة) درجة الحرارة النهائية () وقت الانتظار عند درجة الحرارة النهائية (دقيقة)
50 4 170 -
170 30 300 30
درجة الحرارة
الحاقن: 270
الكاشف: 280
الغاز الناقل: الهيليوم
معدل التدفق: 30 مل/دقيقة
نسبة الانقسام: 10:1
حجم الحقن: 2 ميكرولتر
ملاءمة النظام
العينة: الحل القياسي
متطلبات الملاءمة
الانحراف المعياري النسبي: NMT 10.0%
التحليل
العينات: حل العينة وحل العينة المسننة
احسب النسبة المئوية للمركب B المرتبط بأورليستات في الجزء المأخوذ من أورليستات:
النتيجة = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = ذروة الاستجابة للمركب B المرتبط بأورليستات من محلول العينة
rSP = ذروة استجابة المركب B المرتبط بأورليستات من محلول العينة المسننة
CS = تركيز المركب المرتبط بـ USP Orlistat B RS في المحلول القياسي (مجم/مل)
CT = تركيز الأورليستات في محلول العينة المسننة (مجم/مل)
معايير القبول: تم العثور على NMT 0.05% من المركب B المرتبط بأورليستات.
• الإجراء 3
[ملاحظة-تجنب استخدام القوارير البلاستيكية لتحضير أو احتواء أي محلول في هذا التحليل. ]
المرحلة المتنقلة، والحل القياسي، وحل العينة: قم بالتحضير وفقًا لتوجيهات الفحص.
حل ملاءمة النظام: 10 ميكروغرام/مل من USP Orlistat RS، و0.1 ميكروغرام/مل من USP Orlistat ذو الصلة بالمركب C RS، و0.25 ميكروغرام/مل من USP Orlistat ذو الصلة D RS في الطور المتنقل
النظام الكروماتوغرافي
(انظر الفصل اللوني<621>، مدى ملاءمة النظام.)
تابع وفقًا لتوجيهات الاختبار، باستثناء اللوني لحل ملاءمة النظام.
ملاءمة النظام
عينة: حل ملاءمة النظام
متطلبات الملاءمة
نسبة الإشارة إلى الضوضاء: NLT 3 للمركب C المرتبط بأورليستات والمركب D المرتبط بأورليستات
الانحراف المعياري النسبي: NMT 10.0% لذروة أورليستات
التحليل
العينات: الحل القياسي وحل العينة
احسب النسبة المئوية لكل شوائب في الجزء المأخوذ من الأورليستات:
النتيجة = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = استجابة الذروة لكل شوائب فردية من محلول العينة
rS = استجابة الذروة لـ USP Orlistat RS من الحل القياسي
CS = تركيز USP Orlistat RS في المحلول القياسي (مجم/مل)
CU = تركيز الأورليستات في محلول العينة (ملجم/مل)
F = عامل الاستجابة النسبي كما هو موضح في جدول الشوائب 1
معايير القبول: انظر الجدول 1 الشوائب.
جدول الشوائب 1
الاسم، وقت الاحتفاظ النسبي، معايير قبول عامل الاستجابة النسبية، NMT (%)
فورميليوسينيا 0.10 4.0 0.2
مركب ذو صلة بأورليستات C 0.13 33 0.05
أورليستات حلقة مفتوحة 0.44 1.0 0.2
المركب المرتبط بالأورليستات D*0.90 - محسوبة في
الإجراء 4
أورليستات حلقة مفتوحة أميديك* 0.90 - محسوبة في
الإجراء 4
أورليستات 1.00 - -
د-ليوسين أورليستات 1.18 1.0 0.2
نجاسة فردية مجهولة - 1.0 0.1
* Coelutes في نظام LC هذا، يتم تحديدها باستخدام الإجراء 4.
ن-فورميل-ل-ليوسين.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-فورميلامينو-4-ميثيل-بنتانويلوكسي]-2-هكسيل-3-هيدروكسي-حمض الهيكساديكانويك.
c N-فورميل-ل-ليوسين (S)-1-[(2S,3S)-2-هيدروكسي-3-[1-فينيل-R-إيثيل كاربومويل]نونيل]-دوديسيل إستر.
d N-فورميل-d-ليوسين (S)-1-[[(2S,3S)-3-هكسيل-4-أوكسو-2-أوكسيتانيل] ميثيل] إستر دوديسيل أو مضاد.
• الإجراء 4: الحد الأقصى للمركب المرتبط بأورليستات د
الطور المتحرك: الميثانول والماء (83:17)
محلول ملاءمة النظام: 4 ملغم/مل من USP Orlistat RS و 2.4 ميكروغرام/مل من USP Orlistat ذو الصلة بمركب D RS في الأسيتونيتريل، على التوالي
الحل القياسي: 5.0 ملغم/مل من USP Orlistat RS في الأسيتونيتريل
محلول العينة: 5.0 ملغم/مل من أورليستات في الأسيتونتريل
النظام الكروماتوغرافي
(انظر اللوني 621، ملاءمة النظام.)
الوضع: إل سي
الكاشف: 205 نانومتر
العمود: 4.0-مم × 25-سم؛ 5-ميكرومتر تعبئة L7
معدل التدفق: 0.6 مل/دقيقة
حجم الحقن: 20 ميكرولتر
ملاءمة النظام
عينة: حل ملاءمة النظام
متطلبات الملاءمة
نسبة الإشارة إلى الضوضاء: NLT 3 لذروة المركب D المرتبط بأورليستات
الانحراف المعياري النسبي: NMT 10.0% لذروة أورليستات
التحليل
العينات: الحل القياسي وحل العينة
احسب النسبة المئوية لكل شوائب في الجزء المأخوذ من الأورليستات:
النتيجة = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = استجابة الذروة لكل شوائب فردية من محلول العينة
rS = استجابة الذروة لـ USP Orlistat RS من الحل القياسي
CS = تركيز USP Orlistat RS في المحلول القياسي (ميكروجرام/مل)
CU = تركيز الأورليستات في محلول العينة (ميكروجرام/مل)
F = عامل الاستجابة النسبي كما تم الحصول عليه في جدول الشوائب 2
معايير القبول: انظر الجدول 2 الشوائب.
جدول الشوائب 2
الاسم، وقت الاحتفاظ النسبي، معايير قبول عامل الاستجابة النسبية، NMT (%)
المركب المرتبط بأورليستات D 0.94 1.0 0.2
أورليستات 1.00 - -
أورليستات الحلقة المفتوحة أميديا 1.25 4.3 0.1
أ N-فورميل-ل-ليوسين (S)-1-[(2S,3S)-2-هيدروكسي-3-[1-فينيل-R-إيثيل كاربومويل]نونيل]-دوديسيل إستر.
• الإجراء 5: الحد الأقصى للمركب المرتبط بأورليستات E
المخزن المؤقت: 0.4 N محلول بورات، معدل إلى درجة الحموضة 10.2
عامل مشتق: o-محلول فثالدهيد (OPA). [ملاحظة-إذا لم يكن من الممكن الحصول عليه تجاريًا، يمكن تحضير عامل الاشتقاق بنسبة 1% لكل من 3-حمض المركابتوبروبيونيك وo-فثالديالديهايد في محلول بورات منظم 0.4 مولار.]
الحل أ: قم بنقل 4.1 جرام من ثلاثي هيدرات خلات الصوديوم و40 ملجم من حمض إيثيلين أمين رباعي أسيتيك (EDTA) إلى دورق حجمي سعة 1 - لتر. يذوب في 950 مل من الماء، ويضبط مع 0.1 ن من هيدروكسيد الصوديوم إلى درجة حموضة 7.2. تمييع بالماء إلى الحجم، وإضافة 2.5 مل من رباعي هيدروفوران، وتخلط. تصفية، وديغا.
الحل ب: قم بنقل 2.7 جم من ثلاثي هيدرات خلات الصوديوم و40 مجم من EDTA إلى دورق حجمي سعة 1-لتر. يذوب في 200 مل من الماء، ويضبط مع 0.1 ن من هيدروكسيد الصوديوم إلى درجة حموضة 7.2. أضف 800 مل من الأسيتونتريل والتصفية وديغا.
المرحلة المتنقلة: انظر جدول التدرج أدناه.
الوقت (الدقيقة) الحل أ (%) الحل ب (%)
0 96.7 3.3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96.7 3.3
45 96.7 3.3
الحل القياسي: قم بنقل كمية موزونة تبلغ حوالي 0.2 مجم من مركب E RS المرتبط بـ USP Orlistat إلى رأس 20-مل-قارورة فضائية. أضف 10 مل من هيدروكسيد الصوديوم 4 N، وأغلق القارورة. تسخين القنينة إلى 100 لمدة ساعة واحدة، ثم السماح لتبرد إلى درجة حرارة الغرفة. انقل 2 مل من المحلول الناتج إلى دورق حجمي سعة 50-مل، وخففه بالماء حتى الحجم. أضف إلى 0.5 مل من هذا المحلول 2.0 مل من المخزن المؤقت و0.5 مل من عامل الاشتقاق.
عينة الحل: تابع وفقًا لتوجيهات الحل القياسي، ولكن بدلاً من ذلك استخدم 25 مجم من أورليستات لتحل محل 0.2 مجم من USP Orlistat ذو الصلة بالمركب E RS.
النظام الكروماتوغرافي
(انظر الفصل اللوني<621>، مدى ملاءمة النظام.)
الوضع: إل سي
الكاشف: مضان 340 نانومتر (الإثارة)؛ 450 نانومتر (الانبعاث)
أعمدة
الحماية: 2.1-مم × 2-سم؛ 50-ميكرومتر تعبئة L1
التحليلية: 2.1-مم × 20-سم؛ التعبئة L1
معدل التدفق: 0.5 مل/دقيقة
حجم الحقن: 20 ميكرولتر
ملاءمة النظام
العينة: الحل القياسي
متطلبات الملاءمة
الانحراف المعياري النسبي: NMT 6.0% لذروة المركب E المرتبط بأورليستات
التحليل
العينات: الحل القياسي وحل العينة
احسب نسبة هذه النجاسة في الجزء المأخوذ من الأورليستات:
النتيجة = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = ذروة الاستجابة للمركب E المرتبط بأورليستات في محلول العينة
rS = استجابة الذروة لمركب USP Orlistat المرتبط E RS في الحل القياسي
CS = تركيز المركب المرتبط بـ USP Orlistat E RS في المحلول القياسي (مجم/مل)
CU = تركيز الأورليستات في محلول العينة (ملجم/مل)
معايير القبول
شوائب فردية: تم العثور على NMT 0.2% من المركب E المرتبط بأورليستات.
إجمالي الشوائب: تم ​​العثور على NMT 1.0% من إجمالي الشوائب، وتتم إضافة نتائج الإجراءات 1 و2 و3 و4 و5.
اختبارات محددة
• الدوران البصري، الدوران النوعي<781>
محلول العينة: 30 ملغم/مل في الكحول المجفف
معايير القبول: بين -48.0 و -51.0، عند 20
• تقدير الماء، الطريقة ج<921>: NMT 0.2%
متطلبات إضافية
• التعبئة والتغليف والتخزين: يحفظ في حاويات مغلقة جيداً في درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية.
• معايير مرجعية USP<11>
يو إس بي أورليستات RS
USP Orlistat مركب ذو صلة A RS
USP Orlistat مركب B RS
USP Orlistat مركب ذو صلة C RS
USP Orlistat مركب ذو صلة D RS
USP Orlistat مركب ذو صلة E RS
USP35